Nova técnica de detecção bacteriológica

Existem diversos agentes causadores de infecções alimentares, os biológicos, tais como as bactérias, os vírus, os parasitas, os príons, as toxicinas de origem não bacteriana e os não biológicos, como os poluentes orgânicos persistentes (POP) e os metais pesados.    

Dentre os agentes infecciosos de origem biológica, a salmonela está entre um dos principais causadores das toxinfecções alimentares. Essa bactéria, pertencente à família Enterobacteriaceae, causa uma doença infecciosa chamada salmonelose. Devido à sua grande importância, em relação à segurança alimentar, grandes esforços têm sido despendidos no sentido de tentar diminuir os casos de infecção e de detecção do microorganismo.

No intuito de colaborar com a qualidade dos alimentos, pesquisadores da Universidade do Estado de Iowa, EUA, desenvolveram um estudo com o objetivo de aperfeiçoar a metodologia de detecção e identificação genética de micro-organismos, por meio da qual se realiza a reação de PCR no DNA total extraído de uma amostra do alimento. A pesquisa, que é liderada pelo professor assistente de ciências de alimentos e de nutrição humana, Dr. Byron Brehm-Stecher, tem como objetivo aperfeiçoar o sistema utilizado atualmente, para um novo método, que é mais rápido e que oferece maiores detalhes sobre o genoma da bactéria. O artigo com os resultados do estudo pode ser encontrado na edição desse mês do periódico Nature.

A nova técnica consiste em uma rápida reação de PCR para a amplificação de um gene específico da salmonela, gerando milhões de cópias do DNA com marcador fluorescente. Na etapa seguinte, o produto é purificado, recebe o reagente SNAP71, seguido de um aquecimento do DNA. O resultado desse procedimento é o corte do DNA marcado nas bases nitrogenadas adenina e guanina, produzindo uma solução de fragmentos.

Os fragmentos são separados, colocados em um campo de alta voltagem e selecionados por meio de uma matriz polimérica (gel) que contém capilares de vidro. Ao passarem por esses tubos, cada fragmento é detectado por uma fonte de luz intensa. O novo procedimento não substitui diretamente o seqüenciamento do genoma, no entanto, ocorre a rápida formação de um padrão de reprodutibilidade dos fragmentos.     

A formação desses padrões é uma grande vantagem, pois as cepas de salmonela possuem poucas diferenças nas seqüências de DNA em um gene específico, o que produzirá diferentes padrões de fragmentos. Portanto, com a nova metodologia será possível discriminar as diferentes cepas de salmonela presentes nos alimentos.  A outra vantagem é a rapidez com que esses processos ocorrem.

O uso da técnica será de grande valia, pois permitirá uma rápida detecção e identificação de diferentes cepas que possam estar presentes em um determinado alimento. A maior agilidade poderá ser fundamental para o reconhecimento precoce de surtos de intoxicação alimentar, assim como, impedir a chegada de produtos contaminados ao consumidor. Em situações como essa, o tempo é um fator fundamental para a tomada de decisão, e o novo método se mostrou eficaz nesse quesito também. Os pesquisadores esperam que no futuro próximo, esse processo seja utilizado de forma contínua dentro das indústrias de alimentos.

21/05/2010
Arlei Maturano - Equipe Biotec AHG